ilk kullan>lacak araç mikroskoptur. Mikroskop hücrelerin görün- tülerini büyütürken ay>r>m detaylar>n> da artt>r>r. Birçok mikros- kop çeflidi vard>r bunlardan en önemli ikisi, >fl>k ve elektron mik- roskoplar>d>r lük (rezolüsyon) bir mikroskopta elde edilebilen en yak>n iki nok- ta aras>ndaki mesafedir. Bu da >fl>¤>n dalga boyuna ba¤l>d>r. Bili- nen ayd>nl>k alan >fl>k mikroskoplar>n>n çözünürlü¤ü yaklafl>k 0,2m dir. Çal>flma örnekleri görülen >fl>¤> emer; cam lensler örne- ¤i odaklar ve büyütür. Birçok hücre >fl>¤> çok az emer bu nedenle >fl>k emilimini artt>rmak için boyama gereklidir. Öncelikle hücre- lerle fiksasyon ve alkollerde dehidratasyonu takiben parafin ve- ya plasti¤e gömme ifllemi uygulan>r. Örneklerden mikrotomla kesit almay> boyama ifllemi takip eder. Transmisyon elektron mik- roskobunda (TEM) ayd>nlatma kayna¤> küçük dalga boyuna sahip elektronlard>r. TEM' un çözünürlü¤ü >fl>k mikroskobundan 10 kesildikten sonra plasti¤e gömülür. Kesitler siyah-beyaz kontras- t>n> artt>rmak için a¤>r metallerle boyan>r. Renkli görüntü yoktur. Scanning elektron mikroskop (SEM)'da, kal>n örnekler ve bütün ola- rak hücreler tespit edilip, kurutulup, ince metal film tabakas>yla kapland>ktan sonra incelenir. Üç boyutlu bir görüntü elde edilir. Yüksek- çözünürlük SEM (HRSEM) genifl odaklama derinli¤iyle hücre ve organellerin iç yap>s>n> ay>rt etmeye olanak sa¤lar. optik bölümleri. örnek tablas>n>n alt>ndaki kondensör lensle boyal> örnekte odaklan>r, örnekten geçer ve objektif lensler görüntüyü büyüterek oküler lense iletir. Oküler lens, görüntüyü büyütür ve göze veya foto¤raf pla¤>na yans>t>r. Birçok doku renksizdir. Boyalar >fl>¤> farkl> emerek yap>lar>n farkl> boyanmas>n> ve yap>lar>n tan>nmas>n sa¤lar. bölümleri. elektron demeti geçer. Ayn> >fl>k mikroskobu prensibiyle görüntüyü kondense etmek, odaklamak ve bü- yütmek için lensler kullan>l>r. Bu lensler bobin yap>s>nda elektroman- yetik lenslerdir. Is>nm>fl tungsten fi- lamandan (veya katod) kaynaklanan elektronlar vakum içindeki kolonda anota çekilir. Elektronlar ç>plak göz- le görülemez. Görüntü floresan bir ekranda veya foto¤raf pla¤>nda siyah-beyaz elektron mikroskobu görüntüsü (EM) olarak kaydedilir. TEM'un avantaj> çözünürlük gücünün yüksek olmas>d>r. elektron (sa¤) mikroskobundaki karfl>laflt>rmal> görüntüleri. çevreleyen küçük follikülü hücreleriyle (FH) görülmektedir. >fl>k mikroskobu görüntüsünde parafin kesit hematoksilen ve eozin (H.E.) ile boyanm>flt>r. Hematoksilen, doku kesitlerinde bazofilik, anyonik (negatif yüklü) bölgelere ba¤lanan mavi katyonik bir boyad>r. Eozin pembe, anyonik bir boyad>r ve asidofilik (pozitif yüklü) doku bölgelerine ba¤lan>r. Elektron mikroskobu görüntüsünde ince plastik kesitler a¤>r metallerle (uranil asetat ve kurflun sitrat) boyan>r. Sol: x200; Sa¤: x1800 |