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OrthO-rhumatO | VOL 12 | N°2 | 2014
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tEStS UtiliSéS aCtUEllEmEnt PoUr la détECtion
dES antiCorPS antiPEPtidES CitrUllinéS
CiBlE antiGéniqUE
Les peptides cycliques citrullinés synthétiques de 2
e
géné
ration (CCP2) sont les substrats les plus couramment uti
lisés dans les différents tests commercialisés. Il s'agit d'un
mélange de peptides synthétiques mimant les autoanti
gènes citrullinés retrouvés au niveau des articulations des
patients atteints de PR. Ils ont été sélectionnés à partir de
screening de «banques» de peptides citrullinés pour leur
grande réactivité visàvis de sérums de ces patients. Ré
cemment, une 3
e
génération de test antiCCP (antiCCP3)
a été développée pour augmenter la sensibilité de détec
tion du test, en optimalisant les épitopes du peptide utilisé
comme cible. Des protéines citrullinées ont également été
proposées comme cible dans des méthodes alternatives,
telles que la vimentine, mais n'ont pas fait concurrence
aux CCP, par manque de spécificité (9). Les nouveaux mar
queurs en cours d'étude pourraient améliorer le diagnostic
de PR débutante chez les patients séronégatifs. Les résul
tats préliminaires les plus intéressants concernent les anti
BRAF p10 et UH14 plex (10, 11).
méthodES dE détECtion
A l'heure actuelle, plusieurs plateformes d'immunodo
sage automatisées sont disponibles comme alternative
aux techniques ELISA. Il s'agit de méthodes enzymatiques
d'immunodosage par fluorescence (FEIA), chémilumi
nescence (CLIA) ou électrochémiluminescence (ECLIA)
(Tableau 1) (Figure 2). Ces plateformes, faciles d'utilisa
tion, permettent d'améliorer le délai de réponse des analyses
et la précision des résultats. Un test rapide, qualitatif, sur
sang total capillaire, a également été proposé mais n'est
pas disponible en Belgique.
PErFormanCES diaGnoStiqUES
Les tests antiCCP2 sont toujours considérés comme le
gold standard pour la recherche des ACPA. Bien que
la même source antigénique soit utilisée dans les dif
férents tests, des discordances peuvent être observées.
Une évaluation interne de l'essai utilisé reste indispensable
avant son implémentation au laboratoire. Une sélection
adéquate de la population contrôle et une adaptation des
cut-offs de positivité du test en fonction de la population
étudiée peut avoir un impact important sur les perfor
mances diagnostiques de l'immunodosage, la spécificité
pouvant varier de 80% à 90% en optimalisant le cut-off
initialement proposé par les firmes (12). Certaines études
ont rapporté une sensibilité plus élevée du test antiCCP3
comparé au test anti-CCP-2 pour une même spécificité
(12 ,13), bien que cette différence soit légère et non confir
mée par d'autres (14). Les tests antiCCP3 détectent des
ACPA non détectés par les tests antiCCP2 et vice versa.
Ces résultats discordants illustrent l'hétérogénéité du ré
pertoire d'autoanticorps présents chez les patients atteints
de PR, notamment en fonction du stade de la pathologie.
intErPrétation dES réSUltatS
En l'absence de matériel de référence standardisé, les ré
sultats quantitatifs obtenus avec les différents kits de do
sage ne sont pas superposables et les cut-offs de positivité
Figure 2: détection des anticorps antipeptides citrullinés par
immunodosage.
les anticorps du patient reconnaissent les antigènes fixés
sur un support solide, le plus souvent des billes, et sont
détectés par un anticorps antilgG humaines, conjugé
à une enzyme (qui transforme le substrat ajouté ou
éléctrochimiquement).
Figure 1: Citrullination des protéines.
Conversion enzymatique posttraductionelle d'un résidu arginine en citrulline par une peptidylarginine deiminase. la perte
de charges positives sur la protéine pertubent les interactions inter et intramoléculaires, entraînant des altérations dans le
reploiement des protéines, favorisant leur dégradation par des protéases et permettant l'exposition d'épitopes cryptiques.
H
2
N
N
H
NH
NH
+
2
O
H
2
N
N
H
NH
O
O
H
2
O
NH
3
+H
+
Peptidylarginine deiminase
Ca
++
CCP
CCP
CCP
CCP
CCP
CCP
CCP
CCP